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dna分子與載體分子連接是克隆過程中的重要環節之一，方法有:1粘性末端連接。dna片段兩端的互補鹼基順序稱之爲粘性末端，用同一種限制性內切酶消化dna可產生相同的粘性末端。在連接酶的作用下可恢復原樣，有些限制性內切酶雖然識別不同順序，卻能產生相同末端。2平頭末端連接，用物理方法制備的dna往往是平頭末端，有些酶也可產生平頭末端。平頭dna片段可在某些dna連接酶作用下連接起來，但連接效率不如粘性末端高;3同聚寡核苷酸末端連接。4人工接頭分子連接，在平頭dna片段末端加上一段人工合成的、具有某一限制性內切酶識別位點的寡核苷酸片段，經限制性內切酶作用後就會產生粘性末端。
連接反應需注意載體dna與dna片段的比率。以λ或s質粒爲載體時。形成線性多連體dna分子，載體與dna片段的比率高些爲佳。以質粒爲載體時。形成環狀分子，比率常爲1∶1。
最後是引入寄主細胞。
常用兩種方法:1轉化或轉染。方法是將重組質粒dna或噬菌體dna13與氯化鈣處理過的宿主細胞混合置於冰上，待dna被吸收後鋪在平板培養基上，再根據實驗設計使用選擇性培養基篩選重組子，通常重組分子的轉化效率比非重組dna低，原因是連接效率不高，有許多dna分子無轉化能力，而且重組後的dna分子比原載體dna分子大，轉化困難。2轉導，病毒類侵染宿主菌的過程稱爲轉導，一般轉導的效率比轉化高。
此時的李安，操控着墨蓮人，不斷的收集材料，進行着研究。
三級文明，分子克隆有很多的作用！
分子克隆技術是發展起來的不久，它的出現和應用開闢了分子遺傳學研究的新領域。打開了人類瞭解、識別、分離和改造基因，創造新物種的大門。它的成就對於工業、農牧業和醫學產生深遠影響，並將爲解決世界面臨的能源、食品和環保三大危機開拓一條新的出路。
利用分子克隆技術已將胰島素。人、牛和雞的生長激素、人的干擾素、鬆弛素、促紅細胞生長激素、乙型肝炎病毒抗原和口蹄疫病毒抗原的基因製成工程菌，利用發酵工業進行了大規模生產。還可提高微生物本身所產生的蛋白酶類和抗生素類藥物的產量。
通過遺傳工程看到癌細胞具有逆轉爲正常細胞的可能性。例如sv40病毒引起的小鼠腫瘤細胞，在溫度高時可逆轉爲正常細胞。爲治療半乳糖血症，用帶有大腸桿菌乳糖操縱子的λ噬菌體去感染半乳糖血症患者的離體培養細胞，發現這種細胞的半乳糖苷酶達到了正常水平，並確實能代謝半乳糖。
通過遺傳工程看到癌細胞具有逆轉爲正常細胞的可能性，例如sv40病毒引起的小鼠腫瘤細胞，在溫度高時可逆轉爲正常細胞。爲治療半乳糖血症，用帶有大腸桿菌乳糖操縱子的λ噬菌體去感染半乳糖血症患者的離體培養細胞。發現這種細胞的半乳糖苷酶達到了正常水平，並確實能代謝半乳糖。
